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8-28
鬼峰來源很多,其中主要來源於(yu) 流動相和管路,如:有機相中汙染物,水相中汙染物,緩衝(chong) 鹽,流動相瓶和混合過程產(chan) 生等等。在液相色譜分析中,幾乎不可避免鬼峰的幹擾,尤其在使用了緩衝(chong) 鹽或者酸性添加劑並進行梯度分析時,更易出現鬼峰從(cong) 而幹擾微量或者痕量物質的分離或者定量。方法開發中一旦出現鬼峰,消除鬼峰則需要花費分析人員較多的時間和精力,也是一項非常棘手的工作。鬼峰捕集小柱可以持續有效吸附流動相中的雜質,從(cong) 而縮短了方法驗證和雜質分析的時間。反相色譜梯度分析時,將小柱安裝在梯度混合器和自動進樣...
8-22
PuroSpherSTAR色譜柱的技術主要包括填料技術和裝柱技術,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決(jue) 定性影響。裝柱技術沒有想象中那麽(me) 簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nei) 徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩定、均一的柱床,需要經驗積累。一般情況下,正相反相柱應該都能反衝(chong) ,隻有兩(liang) 端篩板孔徑不對稱的柱子不能反衝(chong) ,不過目前這樣的柱子已經比較少見了。反衝(chong) 是為(wei) 了把柱頭的汙染物衝(chong) 洗掉,反衝(chong) 後還是正著用比較好,以免柱子的兩(liang) 頭都被汙染。建議正向使用,反向衝(chong) 洗。PuroSpherS...
8-14
高效液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲(si) 等組成。柱管多用不鏽鋼製成,壓力不高於(yu) 70Kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nei) 壁要求有很高的光潔度。為(wei) 提高柱效,減小管壁效應,不鏽鋼柱內(nei) 壁多經過拋光。也有人在不鏽鋼柱內(nei) 壁塗敷氟塑料以提高內(nei) 壁的光潔度,其效果與(yu) 拋光相同還有使用熔融矽或玻璃襯裏的,用於(yu) 細管柱。色譜柱兩(liang) 端的柱接頭內(nei) 裝有篩板,是燒結不鏽鋼或鈦合金。取決(jue) 於(yu) 填料粒度,目的是防止填料漏出,柱內(nei) 徑一般是根據柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為(wei) 了...
7-29
固相萃取就是利用固體(ti) 吸附劑將液體(ti) 樣品中的目標化合物吸附,與(yu) 樣品的基體(ti) 和幹擾化合物分離,然後再用洗脫液洗脫或加熱解吸附,達到分離和富集目標化合物的目的。固相萃取具有如下優(you) 點:(1)高的回收率和高的富集倍數。大多數固相萃取體(ti) 係的回收率較高,可達70%~100%;另外,固相萃取的富集倍數一般很高,很多體(ti) 係很容易就能達到幾百倍,少數體(ti) 係甚至能達到幾千或幾萬(wan) 倍,這是一般傳(chuan) 統分離富集方法很難達到的。(2)使用的高純有毒有機溶劑量很少,減少了對環境的汙染,是一種對環境友好的分離富集方法;另...
7-23
賽默飛色譜柱選擇時要掌握色譜柱的主要關(guan) 鍵參數,色譜柱的保護,色譜分析理論以及色譜柱的分類等知識,分析工作者才能做到在工作開展時一針見血的選擇色譜柱,有的放失的開發方法,後心中有數的完成分析工作。賽默飛色譜柱的關(guan) 鍵參數有固定相、內(nei) 徑,長度和液膜的厚度。1)固定相固定相由固體(ti) 吸附劑或塗有固定液的擔體(ti) 構成。擔體(ti) 是一種多孔性化學惰性固體(ti) ,用來支撐固定液。擔體(ti) 的特性是表麵積大、有化學惰性、熱穩定性,孔隙結構和浸潤性。擔體(ti) 分為(wei) 一般分矽藻土和非矽藻土兩(liang) 大類。固定相一般是具有活性的多孔性固體(ti) ...
7-14
在高效液相色譜分析係統中,對溫度控製的要求越來越高,藥典及諸多新的分析方法,也對柱溫給出條件,由於(yu) 恒溫箱可以精確、穩定的控製使用溫度,對於(yu) 提高柱效。使Acclaim色譜柱成為(wei) 高效液相色譜儀(yi) 的重要配套裝置。以高純度具有良好穩定性的矽膠為(wei) 基質,通過嚴(yan) 格控製單分子層形成以及封尾的化學反應條件,可確保柱與(yu) 柱之間有著可靠的重現性。該填料為(wei) 均一的球形顆粒,通過運用的勻漿裝填技術裝填得到的色譜柱,柱床密度均一穩定,可保證具有的柱效。Acclaim色譜柱使用的三個(ge) 使用要點:1.Acclaim...
6-29
免疫親(qin) 和柱是利用抗原抗體(ti) 特異性可逆結合特性的SPE技術,根據抗原抗體(ti) 的高選擇性,從(cong) 複雜的待測樣品中提取目標化合物。免疫親(qin) 和層析常見的用途是純化重組蛋白。免疫親(qin) 和層析是從(cong) 粗混合物中純化蛋白質或核酸理想選擇。如果蛋白質的分子量,疏水性,電荷等未知,親(qin) 和色譜法仍可適用於(yu) 這種情況。一個(ge) 典型例子是嚐試分離具有特定活性的酶時,可以用與(yu) 所選底物相似或相同的連接配體(ti) 構建親(qin) 和柱。免疫親(qin) 和柱的使用要點:1、上柱的樣品溶液應該保持酸堿中性、無懸浮物、甲醇濃度不宜過高;2、若樣品為(wei) 複雜樣品,例如高蛋...
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